植物组织培养的过程
将采来的植物材料细洗干净,切割成适当大小,用70%酒精浸10~30秒,对材料的表面浸润灭菌。用无菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,视采用的消毒液种类,涮洗3~10次左右。再接种到初代培养基中进行培养。等到细胞开始分化,形成愈伤组织的时候,需要进行继代培养,提高生长素浓度,促进根系生长。
将采来的植物材料细洗干净,切割成适当大小,用70%酒精浸10~30秒,对材料的表面浸润灭菌。用无菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,视采用的消毒液种类,涮洗3~10次左右。再接种到初代培养基中进行培养。等到细胞开始分化,形成愈伤组织的时候,需要进行继代培养,提高生长素浓度,促进根系生长。
植物组织培养的过程
第一步,将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。洗时可加入洗衣粉清洗,然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物,除去脂质性的物质,便于灭菌液的直接接触。
第二步,对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。用70%酒精浸10~30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用,加之70%酒精穿透力强,也很易杀伤植物细胞,所以浸润时间不能过长。有一些特殊的材料,如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗,多层鳞片的休眠芽等等,以及主要取用内部的材料,则可只用70%酒精处理稍长的时间。处理完的材料在无菌条件下,待酒精蒸发后再剥除外层,取用内部材料。
第三步,用灭菌剂处理。表面灭菌剂的种类较多,可根据情况选取1~2种。
第四步,用无菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,视采用的消毒液种类,涮洗3~10次左右。无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞。再接种到初代培养基中进行培养。等到细胞开始分化,形成愈伤组织的时候,需要进行继代培养,提高生长素浓度,促进根系生长。
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