氨基酸能否发生双缩脲反应?为什么
氨基酸不能发生双缩脲反应。与双缩脲试剂反应的实际上是肽键,而氨基酸没有肽键,只有两个以上氨基酸在相互缩合形成多肽时才会生成肽键。氨基酸是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物,是羧酸碳原子上的氢原子被氨基取代后形成的化合物。
双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的,而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酪基的化合物与碱性溶液作用,生成紫色或者蓝紫色的络合物。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应,且颜色深浅与蛋白质的含量的关系在一定范围内符合比尔定律,而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关,故可用双缩脲法测定蛋白质的含量。
双缩脲反应主要涉及肽键,因此受蛋白质特异性影响较小。且使用试剂价廉易得,操作简便,可测定的范围为1~10mg蛋白质,适于精度要求不太高的蛋白质含量的测定,能测出的蛋白质含量须在约0.5mg以上。双缩脲法的缺点是精确度低、所需样品量大。干扰此测定的物质包括在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。
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